El método, entero.

A — Separación

Cromatografía

• Modo: HPLC en fase reversa, columna C18 (núcleo sólido, 2,6-5 µm, formato 4,6 × 150 mm).
• Fase móvil: gradiente agua/acetonitrilo con 0,1% de ácido trifluoroacético.
• Detección: UV a 214 nm (absorbancia del enlace peptídico), detector de diodos en fila; se registra también a 280 nm cuando los residuos aromáticos permiten una segunda comprobación.
• Método de plataforma: una única familia de gradientes —cuyos registros de validación se publican con la versión 1.0 del método— cubre la mayoría de péptidos individuales. Los ajustes por compuesto (pendiente del gradiente, tiempo de análisis) se registran por analito y constan en el certificado.

B — Qué significan los números

Pureza y cantidad

• La pureza es pureza cromatográfica: área del pico principal como porcentaje del área total integrada a 214 nm, excluido el frente de disolvente. No es una pureza por balance de masas, y el certificado lo dice.
• La cantidad (mg/vial) se mide contra un patrón de referencia: de farmacopea cuando existe (semaglutida, tirzepatida, liraglutida — retatrutida, cagrilintida y survodutida no tienen monografía todavía) y, en su defecto, un patrón de trabajo interno: un lote de grado investigación ≥98% o de síntesis a medida, caracterizado por análisis de aminoácidos (subcontratado) y con la extinción UV a 214 nm calculada a partir de la secuencia.
• La identidad en el ensayo base es presuntiva: coelución por tiempo de retención con el patrón de referencia bajo el método declarado. La confirmación por espectrometría de masas es un complemento opcional a través de un laboratorio asociado, hasta que nuestro propio LC-MS esté en servicio.

C — Límites, dichos claramente

Lo que este método no puede decirte

• No puede confirmar la identidad molecular por masa: la coelución es un indicio fuerte, no una prueba. Cuando la duda es la identidad, pide el complemento de MS.
• No mide esterilidad, carga de endotoxinas ni metales pesados (previstos como servicios aparte; hasta entonces decimos «no analizado», nunca «conforme»).
• Describe el vial recibido, no el lote del que supuestamente procede, y desde luego no toda la producción del proveedor.
• La pureza cromatográfica puede ocultar impurezas que coeluyen; cuando el espectro del detector de diodos sugiere una, el certificado lo señala.

D — Calidad

Cómo nos mantenemos honestos

• Idoneidad del sistema antes de cada secuencia, con blancos y patrones intercalados dentro de ella. Un fallo anula el análisis, no el informe.
• Preparación por duplicado en toda cuantificación; ambos valores van en el certificado.
• Ronda de calibración ciega contra el laboratorio líder del mercado antes de lanzar, publicada íntegra, y repetida periódicamente después.
• Acreditación ISO/IEC 17025: solicitud prevista en el primer año. Hasta que se conceda no la reivindicamos, y publicamos el avance en el registro de construcción.
• Errores: cuando nos equivocamos, el certificado corregido se publica sobre el original con una nota de corrección visible. El original sigue accesible. Ese es el trato.

E — Alcance

Solo péptidos

Analizamos péptidos de investigación. No aceptamos esteroides anabolizantes, hormona de crecimiento ni ninguna sustancia sometida a control, de nadie y a ningún precio. Las muestras fuera de alcance se destruyen al recibirlas y se reembolsa el pedido menos los gastos de gestión. Es una política firme, no un tramo de tarifa.